Binyrebarken består af tre hovedzoner eller lag, der reguleres af forskellige hormoner, som nævnt nedenfor. Denne anatomiske zoneinddeling kan vurderes på mikroskopisk niveau, hvor hver zone kan genkendes og adskilles fra hinanden på baggrund af strukturelle og anatomiske karakteristika.
Zona glomerulosa Det yderste lag, zona glomerulosa, er det vigtigste sted for produktion af aldosteron, et mineralokortikoid. Syntesen og sekretionen af aldosteron reguleres hovedsagelig af renin-angiotensin-aldosteronsystemet. Zona glomerulosa-cellerne udtrykker et specifikt enzym aldosteronsyntase (også kendt som CYP11B2). Aldosteron er i høj grad ansvarlig for den langsigtede regulering af blodtrykket. Aldosteronets virkninger er på nyrens distalt konvolut tubulus og samleledningsgang, hvor det forårsager øget reabsorption af natrium og øget udskillelse af både kalium (af hovedceller) og hydrogenioner (af interkalerede celler i samleledningsgangen). Natriumretention er også en reaktion fra det distale colon og svedkirtlerne på stimulering af aldosteronreceptorerne. Selv om vedvarende produktion af aldosteron kræver vedvarende calciumindgang gennem lavspændingsaktiverede Ca2+-kanaler, anses isolerede zona glomerulosa-celler for at være ikke-ekscitable med registrerede membranspændinger, der er for hyperpolariserede til at tillade Ca2+-kanaler at komme ind. Sekretionen af aldosteron stimuleres også af adrenocorticotropisk hormon (ACTH). Udtrykket af neuronspecifikke proteiner i zona glomerulosa-cellerne i humant adrenokortikalt væv er blevet forudsagt og rapporteret af flere forfattere, og det blev foreslået, at udtrykket af proteiner som det neuronale celleadhæsionsmolekyle (NCAM) i cellerne i zona glomerulosa afspejler disse cellers regenerative egenskab, idet de ville miste NCAM-immunoreaktiviteten efter at være flyttet til zona fasciculata. Sammen med andre data om neuroendokrine egenskaber ved zona glomerulosa-cellerne kan NCAM-ekspressionen imidlertid afspejle en neuroendokrin differentiering af disse celler. Zona fasciculata Cellerne i zona fasciculata, der ligger mellem glomerulosa og reticularis, syntetiserer og udskiller glukokortikoider, såsom 11-deoxycorticosteron, kortikosteron og kortisol hos mennesker. Det vigtigste hormon, der stimulerer cortisolsekretionen hos mennesker, er ACTH, som frigives fra den forreste hypofyse. Det er blevet vist, at den steroidogene kapacitet i zona fasciculata øges under sygdom hos spædbørn. Zona reticularis Zona reticularis er det inderste kortikallag og producerer androgener, hovedsagelig dehydroepiandrosteron (DHEA), DHEA-sulfat (DHEA-S) og androstenedion (forstadiet til testosteron) hos mennesker. Sekretionen af DHEAS stimuleres også af ACTH.