Chemical Crosslinking: Papel na Ciência das Proteínas e Peptídeos

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Conteúdo: O crosslinking químico refere-se à união intermolecular ou intramolecular de duas ou mais moléculas por uma ligação covalente. Os reagentes utilizados para o efeito são referidos como “reagentes de reticulação” ou “reticuladores”. Com base em factores como a reactividade e o comprimento do espaçador, estes são classificados em diferentes tipos, cada um tendo a sua função e aplicação específicas. Em tempos recentes, a reticulação química surgiu como uma ferramenta eficiente para o estudo de biomoléculas como as proteínas. Ela encontra sua aplicação em vários estudos, incluindo a ligação de proteínas a um suporte sólido para o estudo de receptores de membrana, complexos proteína-proteína, complexos proteína-DNA, e outros. Quando associado a técnicas como a espectroscopia de massa, tem sido utilizado não só para a determinação de estruturas tridimensionais de proteínas, mas também para o estudo das interacções proteína-proteína e determinação de sítios interessantes. Esta combinação de técnicas de espectrometria de massa e bioinformática, acrescentou mais uma dimensão à nossa compreensão actual da química de proteínas. Assim, a reticulação química tem múltiplas utilizações a que pode ser submetida.

Métodos: Fizemos uma pesquisa sistemática em bases de dados bibliográficas e motores de busca como o Google Scholar, Scifinder, Scopus, Mendeley etc. para revisão da literatura de pesquisa. Excluímos trabalhos de pesquisa que relatavam apenas a síntese de moléculas reticuladas e não envolviam nenhum estudo de espectrometria de massa.

Resultados: Sessenta e quatro artigos foram incluídos na revisão. A maioria das referências foi retirada dos últimos dez anos, pois houve um imenso progresso nesta área nos últimos anos. Foram incluídos onze artigos clássicos nesta área que falam sobre a base desta metodologia. Trinta e dois artigos discutiram sobre vários tipos de grupos orgânicos utilizados na concepção de reticulações químicas e várias metodologias que foram utilizadas para melhorar a eficiência das reticulações. Estes artigos também destacam várias estratégias usadas para melhorar a detecção de proteínas reticuladas e vários softwares de computador usados para detectar locais de reticulação a partir de dados de massa. Vinte e um artigos mostraram a aplicação do conceito de prova desta metodologia para detectar proteínas de reticulação in-vivo e in-vitro.

Conclusão: Os resultados desta revisão confirmam a importância do crosslinking químico combinado com espectroscopia de massa como uma alternativa de baixo custo para entender a interação proteína-proteína. As informações geradas por esta metodologia podem ajudar na melhor subestimação de várias doenças e para o desenvolvimento de melhores medicamentos para elas.

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