Chemical Crosslinking: Papel en la ciencia de las proteínas y los péptidos

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Antecedentes: El entrecruzamiento químico se refiere a la unión intermolecular o intramolecular de dos o más moléculas mediante un enlace covalente. Los reactivos que se utilizan para este fin se denominan «reactivos de reticulación» o «reticulantes». En función de factores como la reactividad y la longitud del espaciador, se clasifican en diferentes tipos, cada uno con su propia función y aplicación específicas. En los últimos tiempos, la reticulación química ha surgido como una herramienta eficaz para el estudio de biomoléculas como las proteínas. Se aplica en diversos estudios, como la unión de proteínas a un soporte sólido para el estudio de los receptores de membrana, los complejos proteína-proteína y los complejos proteína-ADN, entre otros. Cuando se combina con técnicas como la espectroscopia de masas, se ha utilizado no sólo para la determinación de las estructuras tridimensionales de las proteínas, sino también para el estudio de las interacciones proteína-proteína y la determinación de sitios interesantes. Esta combinación de técnicas de espectrometría de masas y bioinformática ha añadido otra dimensión a nuestra comprensión actual de la química de las proteínas. Así pues, el entrecruzamiento químico tiene multitud de usos que se le pueden dar.

Métodos: Realizamos una búsqueda sistemática en bases de datos bibliográficas y motores de búsqueda como Google Scholar, Scifinder, Scopus, Mendeley, etc. para revisar la literatura de investigación. Excluimos los trabajos de investigación que sólo informaban de la síntesis de las moléculas reticulantes y no incluían ningún estudio de espectrometría de masas.

Resultados: Se incluyeron sesenta y cuatro artículos en la revisión. La mayoría de las referencias se tomaron de los últimos diez años, ya que ha habido un inmenso progreso en esta área en los últimos años. Se incluyeron once artículos clásicos en este campo que hablan de los fundamentos de esta metodología. Treinta y dos artículos tratan sobre los distintos tipos de grupos orgánicos utilizados para el diseño de reticulantes químicos y las distintas metodologías empleadas para mejorar la eficacia de la reticulación. Estos artículos también destacan varias estrategias utilizadas para mejorar la detección de las proteínas reticuladas y varios programas informáticos utilizados para detectar los sitios de reticulación a partir de los datos de masa. Veintiún artículos mostraron la aplicación del concepto de prueba de esta metodología para detectar el entrecruzamiento de proteínas in vivo e in vitro.

Conclusión: Los resultados de esta revisión confirman la importancia de la reticulación química combinada con la espectroscopia de masas como una alternativa de bajo coste para entender la interacción proteína-proteína. La información generada por esta metodología puede ayudar a comprender mejor diversas enfermedades y a desarrollar mejores fármacos para ellas.

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